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BY-9113RAnti-GPCR TAS1R3G蛋白偶聯受體TAS1R3抗體

本公司經銷GPCR TAS1R3，G蛋白偶聯受體TAS1R3抗體，克隆類型為polyclonal，宿主來源是Rabbit，GPCR TAS1R3G蛋白偶聯受體TAS1R3抗體可應用于WB、elisa、IP、IF、IHC等實驗，歡迎垂詢訂購！貨號：BY-9113R英文名稱：Anti-GPCR TAS1R3中文名稱：G蛋白偶聯受體TAS1R3抗體其他名稱：名G protein coupled receptor; Sac; Saccharin preference; Sweet taste receptor T1R3; T1 R3; T1R 3; T1R3; TAS1 R3; TAS1R 3; TAS1R3; Taste receptor type 1 member 3; Taste receptor type 1 member 3 precursor; TR 3; TR3; TS1R3_HUMAN.抗體來源：Rabbit克隆類型：polyclonal蛋白分子量：predicted molecular weight: 92kDa純化方法：affinity purified by Protein A交叉反應：hu, mo, rat, cow, dog產品介紹：The sense of taste provides animals with valuable information about the quality ａnd nutritional value of food. There are four widely accepted categories of taste perception: sweet, bitter, salty ａnd sour. A controversial fifth taste, known as umami or monosodium glutamate （MSG）, has also been described. A family of G protein-coupled receptors are involved in taste perception ａnd include T1R, which is involved in sweet ａnd umami taste perception, ａnd T2R, which is involved in bitter taste perception. The T1R family consists of three members: T1R1, T1R2 ａnd T1R3. These proteins form heterodimers, which alter the selectivity of the subunits. The T1R2 ａnd T1R3 heterodimer functions as a receptor for sweet taste, ａnd recognizes several sweet-tasting molecules such as sucrose, saccharin, dulcin ａnd acesulfame-K. The T1R1 ａnd T1R3 heterodimer recognizes L-amino acids to perceive umami taste. Sweet taste transduction is carried out by two pathways. First, sucrose ａnd other sugars activate Gas via the T1Rs, which activates adenylyl cyclase to generate cAMP. Artificial sweeteners bind to either G∫©- or Gåq-coupled T1Rs to activate PLC ∫2 ａnd generate IP3 ａnd DAG. Both pathways ultimately lead to neurotransmitter release. The mouse T1R3 gene maps to chromosome 4 near the Sac locus, a primary determinant of sweet preference in mice. It is expressed in a subset of taste cells in circumvallate, foliate ａnd fungiform taste papillae.Function : Putative taste receptor. TAS1R1/TAS1R3 responds to the umami taste stimulus （the taste of monosodium glutamate）. TAS1R2/TAS1R3 recognizes diverse natural ａnd synthetic sweeteners. TAS1R3 is essential for the recognition ａnd response to the disaccharide trehalose （By similarity）. Sequence differences within ａnd between species can significantly influence the selectivity ａnd specificity of taste responses.Subunit : Forms homodimers or heterodimers with TAS1R1 ａnd TAS1R2.Subcellular Location : Cell membrane; Multi-pass membrane protein.Tissue Specificity : Expressed in vascular endothelium.Post-translational modifications : Phosphorylated by FER ａnd other protein-tyrosine kinases. Phosphorylated at Ser-288 by PAK7/PAK5. Dephosphorylated by PTPRJ.Similarity : Belongs to the G-protein coupled receptor 3 family. TAS1R subfamily.

該公司產品分類： Roche試劑生化試劑最新抗體其他培養基微生物學實驗配套試劑及試紙管裝培養基一次性培養基平板顯色培養基美國藥典培養基（USP標準）金黃色葡萄球菌檢測培養基酵母、霉菌檢測培養基化妝品檢測培養基弧菌檢測培養基罐頭食品商業無菌檢測培養基動物細胞培養基大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養基產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養基阪崎腸桿菌檢驗培養基 2010年中國藥典版歐洲藥典培養基（EP標準）

Anti-GPCR G2A抗體,G蛋白偶聯受體G2A抗體

抗體種屬：兔多抗，小鼠單抗

濃度:1mg/ml。

抗體的相關標記：

HRP,Biotin,Gold,RBITC,AP,FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7,PE,PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7,APC,Alexa Fluor 350,Alexa Fluor 488,Alexa Fluor 555,

Alexa Fluor 647

Anti-GPCR G2A抗體,G蛋白偶聯受體G2A抗體交叉反應：human，rat，mouse，pig，dog

應用：可以用于做石蠟切片免疫組化，冰凍切片免疫組化，Elisa，WB，免疫熒光等實驗。（公司備有抗體及以下抗體做免疫組化與WB所需的二抗）

稀釋：

1、Western Blotting (starting dilution 1:200, dilution range1:100-1:1000)

2、Immunoprecipitation [1-2 μg per 100-500 μg of total protein(1 ml ofcell lysate)]

3、Immunofluorescence (starting dilution 1:50, dilution range 1:50-1:500)

4、ELISA (starting dilution 1:30, dilution range 1:30-1:3000)

5、Immunohistochemistry(including paraffin-embedded sections) (starting dilution 1:50 dilution range 1:50-1:500)

Anti-GPCR G2A抗體,G蛋白偶聯受體G2A抗體<>

要獲得漂亮的Western Blot結果，離不開一株質量優異的抗體。抗體選擇有很多需要注意的地方，選擇單抗還是多抗，什么種屬的，用不用考慮免疫原，價格如何等等。這些在其他地方已經有過比較多的討論，這里提出這個問題，主要想強調兩個經常被忽視的因素：

1. 靈敏度/檢測限

“靈敏度”最初是一個統計學概念，表示樣本中檢測結果陽性數占所有陽性樣品的比例。擴展到各個領域當中就成為各種機器或方法的性能指標，靈敏度越高，越能反應測定值的實際情況。在Western Blot試驗中，如果要量化抗體檢測的靈敏度就需要一個參數——抗體檢測限。抗體檢測限越低，說明會有越少的待測抗原被漏檢。因此，對于定性或半定量的Western Blot試驗而言，抗體檢測限是一個重要指標，抗體檢測限低的抗體效能高，使用這樣的抗體可以獲得更真實的實驗結果。所以，選購抗體用作WB實驗，在可能的情況下要選擇檢測限更低的抗體。

2. 注意1抗體,阿米洛利結合蛋白1抗體,用于WB、FITC、IHC-P、IHC-F、IF、Elisa濃度

抗體濃度對于商品化抗體的影響有兩方面。首先，較高濃度的抗體（>0.5mg/mL）通常性質更穩定，受生產工藝和成本控制等因素影響，不同品牌的抗體的濃度也不相同，所以購買時應注意比較；另外，經驗不足的實驗者往往被抗體的體積迷惑，然而相同質量下，低濃度的抗體體積更大（例如有的經銷商會對抗體進行惡意稀釋再轉售），所以，計算抗體性價比的時候應該考慮的因素是抗體的質量而非體積。

孵育一抗

A. 先將需要檢測的抗體準備好，并決定好它們的稀釋度。

B. 配好5%的Milk（TBST溶解），按要求稀釋好抗體。注意，如需高比例稀釋，

最好采用梯度稀釋。

C. 將稀釋好的抗體和膜一起孵育。一般采用RT 1小時，可根據抗體量和膜上

抗原量適當延長或縮短時間。

注意：為了便于后面分析結果，我們一般會選用已確定分子量大小而且純度高的抗體作為marker與一抗同時孵育。

洗滌

用 TBST先快速洗三次，把milk盡快的wash掉。然后5mins *5。

洗滌是為了洗去一抗與抗原的非特異性結合，洗滌的效果直接影響結果背景的深淺。

孵育二抗

孵育 RT1 小時。一般采用HRP標記的二抗，稀釋比例為1:5000。二抗的稀釋比例不能太低，否則容易導致非特異性的結合。注意二抗的選擇有多種，要根據一抗來選擇抗兔、抗鼠或者抗羊的二抗，以及根據后面的顯色條件來選擇HRP、AP或者GOD（葡萄糖氧化酶）酶鏈的二抗或者標志其他探針（如核素等）的。

洗滌：用TBST先快速洗三次，把milk盡快的wash掉。然后5mins *5。

洗滌是為了洗去二抗的非特異性結合，洗滌的效果直接影響結果背景的深淺，所以洗滌一定要干凈。

公司竭誠為您提供 Anti-GPCR G2A抗體,G蛋白偶聯受體G2A抗體,用于WB、FITC、IHC-P、IHC-F、IF、Elisa等，歡迎來電咨詢訂購！

phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)代測廠家磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

phospho-AMPK beta 1 (Ser108)代測廠家磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體

phospho-ALK (Tyr1604)代測廠家磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

phospho-ATM(Ser1981)代測廠家磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體

phospho-ATP citrate lyase (Ser455)代測廠家磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體

phospho-ATR (Ser428)代測廠家磷酸化ATR抗體

AMN1代測廠家細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體

ALG11代測廠家天門冬酰胺連接糖基化11抗體

ASF1A代測廠家細胞衰老相關蛋白ASF1A抗體

AGPHD1代測廠家氨基糖苷類磷酸結構域蛋白抗體

ASGPR1代測廠家唾液酸糖蛋白受體1抗體

ARSF代測廠家芳香基硫酸酯酶F抗體

Anti-NF-H抗體促銷高分子量神經絲蛋白抗體

Anti-Collagen Ⅱ抗體促銷??抗Ⅱ型膠原抗體

Anti-NF-M抗體促銷中分子量神經絲蛋白抗體

Anti-FAM3B/PANDER抗體促銷??胰腺衍生因子抗體

Anti-HPV16 E7 protein 抗體促銷??人乳頭瘤病毒16型E7抗體

Anti-Tubulin-β?抗體促銷?微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）

Anti-CIDEB 抗體促銷??CIDEB抗體

Anti-SPAG5/map126抗體促銷?抗精子相關抗原5抗體

Anti-Smad2/3抗體促銷?Smad 2/3抗體

Anti-AD7C-NTP/NTP/AF抗體促銷神經絲蛋白抗體

Anti-Galectin-3??抗體促銷半乳糖凝集素-3抗體

Anti-Ki-67?抗體促銷?Ki-67 Antigen抗體

Anti-P63 protein抗體促銷P63 腫瘤抑制基因抗體

Anti-Spindlin 1/SPIN-2抗體促銷?Spindlin 1/SPIN-2 腫瘤形成相關基因抗體

Anti-ER-α抗體促銷??雌激素受體α

Anti-BIRC5抗體促銷細胞凋亡抑制因子5抗體

Anti-CXorf36 抗體促銷?X染色體開放閱讀框36抗體

Anti-HCV-HCBP1/ACY-3抗體促銷??丙型肝炎病毒核心蛋白結合蛋白-1抗體

Anti-BK channel抗體促銷BK通道蛋白抗體

Anti-HSP-27抗體促銷?熱休克蛋白-27抗體

Anti-PEDF抗體促銷色素上皮源性因子抗體

Anti-COX2/Cyclooxygenase 2??抗體促銷前列腺素氧化環化酶2抗體

Anti-ADAM-TS7抗體促銷整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體 (N端抗體)

Anti- KGF/FGF-7抗體促銷?角質形成細胞生長因子/纖維母細胞生長因子-7抗體

Anti-FGF-8/HBGF-8 抗體促銷??成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8抗體

Anti-CD56/NCAM1抗體促銷?神經細胞粘附分子1抗體（Elisa IP IHC 用）

Anti-HIF-1α 抗體促銷?缺氧誘導因子1α 抗體

該公司產品分類：其它ELISA試劑盒葡聚糖凝膠常用試劑碳水化合物氨基酸蛋白質科研抗原，蛋白人ELISA試劑盒大鼠ELISA試劑盒小鼠ELISA試劑盒植物激素類ELISA試劑盒馬和羊ELISA試劑盒雞狗豬elisa試劑盒兔子ELISA試劑盒豬ELISA試劑盒標記蛋白標記熒光二抗標記熒光一抗電泳試劑免疫組化WB二抗

電源模塊PCR-SIN15V48F00電源模塊PCR-SIN15V48F00

電源模塊PCR-SIN15V48F00 優勢供應，原裝庫存現貨，質量。

Mastercycler nexus德國艾本德eppendorf 鋁制梯度PCR儀 6331000076

德國艾本德eppendorf Mastercycler nexus 鋁制梯度PCR儀 6331000076

Mastercycler® nexus flat eco,

圖形化編程界面，直觀簡便

占地面積小

E-mail 提醒功能

貨號 6330000072Mastercycler® nexus gradient,

圖形化編程界面，直觀簡便

占地面積小

極其靈活的通用模塊

可連接 2 臺 Mastercycler nexus eco PCR 儀

帶有梯度功能

E-mail 提醒功能

自動調節高度的 flexlid 熱蓋，適用不同耗材

貨號 6331000076Mastercycler® nexus eco,

圖形化編程界面，直觀簡便

占地面積小極其靈活的通用模塊

E-mail 提醒功能

自動調節高度的 flexlid 熱蓋，適用不同耗材

貨號 6332000070 產品特性：

- flat 模塊設計，可放置 1-4 塊載玻片- 圖形化程序編輯，直觀簡便，中文操作界面- 具 E-mail 提醒功能- 一臺 Mastercycler nexus flat 可連接兩臺 eco 經濟型 PCR 儀- USB 接口可連接鼠標、U盤和打印機等，方便儀器操作、數據傳輸和程序擴展- 可選配 USB 加密狗，對半導體元件進行快速檢測- 體積小巧、低能耗、超靜音運行- 2 年保修

型號：共 2 款Mastercycler^® nexus flat PCR 儀Mastercycler^® nexus flat eco* PCR 儀

*儀器需要連接一臺帶有控制面板的 Mastercycler nexus PCR 儀（包括 flat，X1 系列）

產品特性

圖形化編程界面，直觀簡便

占地面積小

極其靈活的通用模塊

可連接 2 臺 Mastercycler nexus eco PCR 儀

帶有梯度功能

E-mail 提醒功能

自動調節高度的 flexlid 熱蓋，適用不同耗材

Mastercycler nexus flat PCR儀核心參數

± 0.2 ℃
≈3℃/S
<0.3℃ (at 20~72℃) , <0.4℃(at 90℃)
96孔
原位PCR儀

該公司產品分類：一次性手套實驗室手套東南儀誠醫用冷藏箱/超低溫冰箱上海精密體視顯微鏡樂山東亞組織研磨儀上海凈信中科都菱攪拌器離心機 Lavibe樂斐天平奧豪斯上海申安天津泰斯特水質分析儀水分儀濁度計

熒光定量PCR儀燈泡L6420-F 12V75W美國ABI 7300/7500

熒光定量PCR儀燈泡L6420-F 12V75W美國ABI 7300/7500日本富士能VP-4400電子胃鏡燈泡HLX64634 15V150Wolympus奧林巴斯胃鏡燈泡15V150W MD-151 JCM 15V-150W FPBOSHIN JCR 7.5V48W LM-EB50-B專用燈泡PHILIPS胃鏡燈泡6423FO 15V150WOSRAM胃鏡燈泡64634HLX 15V150WOLYMPUS顯微鏡專用燈泡 6V30W 5761美國哈希1720E/1720D低量程濁度儀專用燈泡美國哈希1900C/2100P濁度儀專用燈泡美國哈希2100Q/2100N/2100AN濁度儀專用燈泡美國哈希DR2800/DR2700/DR5000分光光度計專用鎢燈美國哈希DR5000分光光度計專用氘燈OSRAM熒光顯微鏡燈泡HBO 100W/2 HBO 100W/2OLYMPUS倒置顯微鏡燈泡 LS-30尼康 Nikon 20533 顯微鏡燈泡 jcr 6V20W燈杯棱杯 MR11奧林巴斯OLYMPUS,CK,LSM/N/P顯微鏡燈泡6V 2A GB-4,3-6V2A GB-4Leica/Leitz顯微鏡燈泡型號如下，燈泡型號：ZEISS蔡司顯微鏡燈泡HLWS5-A 6V 25W,NARVA 55147金屬片米泡光源尼康NIKON,LEITZ,LEICA顯微鏡用6V 15W卡口燈泡,優秀USHIO 8018JENA蔡司ZEISS生物醫學顯微鏡燈泡ASL 55147帶金屬片6V 25W光源LEICA萊卡384-643 手術顯微鏡燈泡384643 12V50W 徠卡HLX4643 OSRAM熒光顯微鏡燈泡HBO 103W/2 HBO 103W/2OSRAM 熒光顯微鏡燈泡HBO 50W AC HBO 50W/AC賓德內窺鏡專用（橫插）用燈泡21V150W原裝富士能FUJI EFN 12V75W Fujinon88胃鏡內窺鏡燈泡瑞士HS900-930裂隙燈眼科燈泡OP2366 6V4.5A Japan奧林巴斯olympus CHK-220V20WSB 顯微鏡燈泡OLYMPUS奧林巴斯纖維喉鏡,支氣管插管鏡燈泡MAJ-525,2.5V0.7AOLYMPUS奧林巴斯LS-30,6V30W倒置顯微鏡燈泡OLYMPUS老式顯微鏡燈泡6V5A TB-1，6-8V5A模擬定位機及KOWA檢眼鏡SL5用1030K1001,HOSOBUCHI的12V 20W燈泡豪斯瓷HOSOBUCHI光學燈泡OP2105 6V 2A,BA15D雙觸點鎢絲燈Kenswick 22.8V120W手術無影燈燈泡（東莞市毅邁光源照明有限公司李小姐 13652554836 13538334922 QQ:932502495 321202867）

該公司產品分類：鹵素燈泡冷光源氙燈檢眼鏡燈泡生化分析儀燈泡冷光源氙燈

96T/48T雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體ELISA試劑盒現貨供應，雞(sEPCR)ELISA試劑盒價格

名稱：雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒

規格：96T/48T 中英文雙版說明書提供免費代測

包裝：試劑盒

類別：ELISA試劑盒/雞經營品牌：進口、國產

保存：2-8℃

有效期：6個月

運貨方式：專門快遞免費送貨

價格：電議

索取說明書或有技術問題請聯系我們的在線銷售人員！【凡在公司購買ELISA試劑盒的客戶，可享受我司提供的免費代測服務、全程技術指導及中英文雙版說明書；公司還提供完整售后服務，如有問題可聯系我司銷售人員，我們會以最快的速度為您解決問題！】

雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床，使用前仔細閱讀說明書。

ELISA試劑盒的標本有血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等。

ELISA試劑盒進口分裝特點：重復性好，板內、板間變異系數均<9 %。試劑的組份都多給20%的富余量，確保完成48/96孔的檢測，避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適（均為1:30）, 方便試驗操作者準確地做稀釋工作，保證實驗結果的重復性。

雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒相關促銷產品：

雞巨噬細胞替代激活相關化學因子1（AmAC-1）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T雞免疫核糖核酸（Irna）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T雞β內酰胺酶（β-lactamase）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T雞流行性乙型腦炎抗體IgG（JE IgG）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T雞α葡萄糖苷酶（a-Glu）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T

馬生長激素（GH）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T馬免疫球蛋白E（IgE）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T馬β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）ELISA試劑盒 ELISA. 96T/48T

南京森貝伽生物科技有限公司供應各種種屬、各種系列的ELISA試劑盒，同時還代理不同品牌、不同價格檔次的ELISA試劑盒。價格低廉,質量保證。公司產品種類齊全，還長期供應各種標準品、培養基、生物試劑、抗體等科研試劑。產品性價比高，值得信賴！

該公司產品分類：瓊脂糖中檢所標準品蛋白溶液蛋白提取其他ELISA試劑盒牛、羊、馬、駱駝ELISA試劑盒染色劑蛋白染色培養基染色液鴨、猴ELISA試劑盒磷酸緩沖液 te緩沖液緩沖液 pbs緩沖液免疫印跡蛋白檢測表達純化蛋白酶抑制劑蛋白電泳

Blend Taq 價格 PCR酶貨號:BTQ-101 北京生物試劑

規格：250u 保存溫度:-20

保證質量專售科研試劑，價格更優惠！

北京綠源博德生物公司是國家重點實驗室及國內各大院校長期指定供應商，公司產品物美價廉,主營Toyobo品牌產品、ELISA試劑盒、進口國產血清、標準品、培養基、潮霉素B、醫藥中間體等優質試劑產品。歡迎來電咨詢及訂購！

Blend Taq 價格 PCR酶貨號:BTQ-101 北京生物試劑

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以上產品北京現貨供應，歡迎來電咨詢！

Blend Taq 價格 PCR酶貨號:BTQ-101 生物試劑

北京綠源博德生物科技有限公司是一家高科技生物技術企業，長期供應常規生化試劑，血清，培養基，大量現貨。公司在保證質量同時，以價格優、到貨快、服務周到、誠信交易為宗旨與理念，致力于各種生物試劑、抗體、血清、Elisa試劑盒、細胞因子的銷售推廣及服務工作。歡迎來電咨詢及訂購！

該公司產品分類：氨基酸量大詢價生物緩和液量大詢價分離試劑培養基蛋白質核酸及其行生物碳水化和物抗生素維生素染色劑其他生化試劑 HyClone進口原裝血清總代理 GIBCO進口原裝血清總代理 Sigma血清 PAA進口原裝血清總代理抗生素類酶和輔酶色素試劑國產血清培養基

DTC-4梯度PCR基因循環擴增儀

DTC-4梯度PCR基因擴增儀

◆ 技術指標 specifications

型號規格 Model	DTC-4 （96 +）
樣品臺容量 Block Capacity	0.2ml x 96＋ 0.5ml x 77、12×8聯排管、96微孔板、原位板 (選購件)
溫控范圍 Temperature Control Range	0-99℃
升溫速度 Heating rate	3℃/Sec
降溫速度 Cooling rate	2℃/ Sec
*控溫精度度和均勻度 Temperature Accuracy	±0.1℃
熱蓋溫度 Hot Cover Temperature	105℃
可記憶程序數目 No. of Programs	99個
溫階 Temperature step	1-30個
保溫時間 Set Time	1 sec.-99minutes 59sec.
單文件內可設置多個循環 More than one repetitions	多文件連接 More than one documents connect.
產品外形尺寸 Size (WDH)	27cm x 23cm x 24cm
產品重量 Weight	6kg
使用環境 Operating Environment	溫度5-40℃，相對濕度≤80％ Temp. 5-40℃, Relative Humidity ≤80％
* 寬電壓工作范圍 Power Supply	AC170-270V，
* 保修年限 Warranty period	2年 2Year
選配 choice	HBV、HCV、HIV、TB、HPV、CT、NG、UU、YMDD等熒光和各種電泳PCR試劑

該公司產品分類：高壓滅菌器系列恒流泵系列干燥箱系列培養箱系列電泳設備 PCR系列唾液DNA樣本采集管食品安全檢測干式恒溫器系列潔凈工作臺系列生物安全柜

北京RT-PCR實驗代做支持技術售后服務-北京冬歌生物

RT-PCR實驗有三步：抽提RNA，RT，PCR。

要求：

1.做RT前必需測RNA濃度，逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求，常用500ng或1ug。

2. RT按要求做，一般不會出太大問題。

3. PCR，按常規。但如需擴長片段，則對前兩步要求較高，需要有完整的cDNA存在，不是單改變Mg2+濃度、退火溫度能解決的。

1）RT和PCR時的引物設計是不是一定要先知道目的基因的序列？必須

在RT時，引物設計有3種方法即a：Random 9mers；b：Oligo dT-Adaptor Primer；和c：特異的下游引物。如果用a和b方法，是擴增的所有的cDNA（理論上），還要用此產物做PCR 的模板繼續擴增。

M-MLV RT 1µl

_____________________________________________

25µl體系

以上42℃孵育60分鐘，然后70℃ 10分鐘。

三．PCR

1．RT-PCR體系：

cDNA 2µl

引物1（10pmol/µl） 1µl

引物2（10pmol/µl） 1µl

Buffer（10X） 2.5µl

Taq E 0.5µl

dNTP（10mM） 2µl

dd H2O 16µl

_____________________________________

25µl

北京RT-PCR實驗代做支持技術售后服務-北京冬歌生物

PCR服務要求：

1、請您提供新鮮的且盡量多的樣品（不少于100mg/樣品），或直接提供純化好的總DNA（大于5ug/樣品）。

2、請通過E-Mail提供已知的全長基因序列。

3、請提供詳細背景資料：DNA來源、豐度等。

操作程序：

1、根據基因序列設計特異性的引物。

2、提取DNA。

3、PCR，進行實驗結果分析。

4、實驗完成后，提供完整的實驗報告（含電泳圖）及引物等實驗材料。

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PCR：

1、參照基因 PCR

參照基因一般選擇看家基因（長表達、高表達量的基因），常用18S、β－actin、bubulin、GAPDH，其中ACTIN最為普遍；

參照基因與目的基因在同一個管子內進行PCR反應的情況下，稱之為內參；

參照基因與目的基因在不同管子內反應成為外參；

由于內參可能與目的基因競爭模板及酶，或造成其它干擾，外參的應用較為普遍。

2、目的基因PCR

典型的引物18到24個核苷長，引物需要足夠長，保證序列獨特性，并降低序列存在于非目的序列位點的可能性。

RT-PCR實例：

1、實驗材料：擬南芥野生型Ws及突變體m1、m2花序

2、實驗目的：分析m1、m2與野生型花序中G1基因的表達的差異

3、實驗步驟：設計ACTIN及G1基因的引物；分別抽取野生型Ws及突變體m1、m2花序RNA，DNase I處理，以盡量去除基因組DNA；電泳檢測，估計RNA總量；取1ug左右的RNA進行反轉錄；

取反轉錄好的cDNA總量的1/10（10ul反轉錄體積則取1ul），稀釋10倍（稀釋至10ul），取1/10（1ul）為模板，用ACTIN引物、普通PCR體系、20－25個循環、以基因組DNA為對照（因為引物跨內含子，所以基因組DNA擴增出的條帶大小與cDNA擴增出的條帶大小不同，以去除殘留的基因組DNA的影響）做PCR；

取等量產物電泳，根據電泳條帶的亮度調整模板量（如m1的亮度為Ws的2倍，則下次PCR時m1的模板為0.5ul），直到電泳亮度基本一致，可認為此時所取的不同體積的野生型Ws及突變體m1、m2模板里RNA的含量基本相同。

以G1基因引物，按調好的模板體積做PCR，電泳。

根據電泳條帶的亮度比較野生型Ws及突變體m1、m2中G1基因的表達差異。

如有需要歡迎來電咨詢 QQ: 電話： 400--1113

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