產品名稱：大黃魚腎細胞；PCK

產品類別：其他細胞系

生長特性：貼壁生長

培養體系：DMEM（高糖）+10%FBS，28°或者21°培養

傳代方法 ：1：2傳代

凍存條件：無血清細胞凍存液

規格：1×10^6cells/T25培養瓶

貨號：GOY-01X2092

注意事項：

1. 收到大黃魚腎細胞；PCK后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

形態特性 上皮細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 草魚肝臟細胞由長江水產所建立鑒定，用于草魚基礎研究和病毒疾病防治研究。

培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C15

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

大黃魚腎細胞；PCK【培養指南】

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

大黃魚腎細胞；PCK【細胞凍存】

待細胞生長狀態良好時，可進行293/HEK-293細胞|細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

【復蘇的原則】

快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。復旦細胞庫全國各地均可發貨，全國統一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

大黃魚腎細胞；PCK實驗報告：

一、分離與培養：

    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織完全被消化；

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

    5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗（Abbioscience公司），然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃條件下放置1h；

    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。

pMOLWTMARKER,DNA,HIGHRANGE*DRYICEDNA Marker生物技術級150 gFrozen

(2-脫氧-D-葡萄糖)

F6P6-嶙酸果糖二鈉500U4種分開/套，100mM/種

巴豆全;丁烯全(反式); β-基炳烯全 Crotoncldqhydq;trcns-2-Butqncl; Crotoni cldqhydq; β-Mqthylccrolqin; Propylqnq cldqhydq; 13-73-9

ATP酶測試盒(測組織及細胞膜的可測Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶，樣本處理前不需高速離心)shēng huà shì jì容量：RT50支/包

丁烷磺酸鈉/1-丁烷磺酸鈉/丁烷-1-磺酸鈉鹽/Sodium 1-butanesulfonate IPC，98% 5克 國產/進口

伊紅染液shēng huà shì jì容量：10片/箱

VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級

鱗脂酰醇安(冷藏運輸) PhosphctidylqthcnolcMinq 3938/8/6

鹽大黃魚腎細胞；PCK酸氮芥/氮芥鹽酸鹽/恩比興/二甲基/N-甲基-N-(2-乙基)-2-鹽酸鹽/鹽酸2,2-二N-甲基二/氮芥子氣/甲基雙(2-乙)胺/Chlormethine hydrochloride BR，98%， 5、10克 國產

二茂鐵shēng huà shì jì容量：100克

54663-78-42-(三丁基錫)噻吩 97%2-(TRIBUTYLSTANNYL)THIOpxenE

血小板稀釋液(計數液)shēng huà shì jì容量：250個/包

無水四化錫 Ttin chloride 7646-78-8 50G 通用試劑

六水化鍶 Strontium Chloride Hexahydrate (≥99%) 10025-70-4 250G 通用試劑

MUG營養瓊脂培養基28267用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的大腸埃希氏菌(GB/T5750.06)。

酵母提取物瓊脂(CM0019) Oxoid incubation media 酵母提取物瓊脂(CM0019) Oxoid

莫格球擬酵母 食用 支/瓶

LST-MUG

MycoplasmaBrothMedium

動力-鹽培養基(B法)250g用于產氣莢膜梭菌的動力和鹽還原試驗

KF鏈球菌肉湯 KF Streptococcus Broth 用于鏈球菌的選擇性增菌培養

Tergitol-7瓊脂 Tergitol-7 Agar 250克 大腸菌群的鑒定

LESEndo瓊脂用于濾膜細菌計數(Merck方法)incubationmediaLESEndo瓊脂用于濾膜細菌計數(Merck方法)

賴氨酸脫羧酶培養基 5g 生化培養基，賴氨酸脫羧酶試驗(GB、SN標準)

上海谷研實業有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的銷售,主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養基、標準溶液產品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產品。    

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